一张芯片单次可检测2-10个靶蛋白，是一次性孵育10个抗体，还是需要洗脱重孵育呢？

单次检测10个靶蛋白是通过洗脱重孵育的方式实现的。目前国际上做到的极限是12个，因为剥离抗体对抗原有不可逆的损失，测试的结果表明，经过4次剥离，即使丰度再高的蛋白也检测不到了。故若一次用3种不同的激发光检测3种蛋白，经过4次洗脱重孵育，3×4=12，即可检测12个蛋白。

建议在做单细胞蛋白检测之前，先用传统方法确定目标蛋白在细胞中的表达丰度情况，按照丰度从低到高进行检测。目前发表的文章一般是检测1-3个蛋白，为了得到更利于发表的数据，我们建议单次检测 1-3个蛋白，洗脱重孵育检测4-6个蛋白。