单细胞western对抗体有特殊要求吗?和传统western的抗体孵育有何不同?
传统western能够孵育的抗体都可以用于单细胞western。单细胞western的抗体孵育过程和传统western 基本一致,室温下先孵育一抗,然后荧光二抗。区别在于单细胞western不需要转膜,电泳分离结束后,机器会通过紫外光照射将蛋白固定在芯片的凝胶层里,这是该专利技术的核心。新型光敏凝胶材料的蛋白固定率可以达到93.8%,蛋白损失小且背景荧光低,故可以直接在芯片上进行抗体孵育。
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