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常见问题

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该设备的功能是什么？

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定性定量分析单细胞多重蛋白，检测细胞间不同蛋白的表达。

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该设备的原理是什么？可以应用到哪些领域？

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单细胞多重蛋白分析系统（mWB-X2）基于单细胞免疫印迹技术，采用特殊设计的可独立分离收集数千个单细胞的免疫印迹芯片；细胞经原位裂解释放蛋白，并依照蛋白分子量通过电泳分离，再针对不同蛋白选择不同荧光染料进行原位免疫学标记，利用荧光扫描仪/共聚焦显微镜等采集信号，通过智能软件快速分析，实现单细胞多重蛋白定性和定量分析，全程耗时仅 4-6 h。 既可以应用于肿瘤、免疫、神经、血液等相关的科研和医疗等领域，用于疾病临床诊断与治疗及感染性疾病、自身免疫性疾病、神经系统疾病、创新药物研发等；也可以应用于对痕量、快速、精准检测有特定要求的司法鉴定等领域。

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设备是国产还是进口的？

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MONO-X1是唯一一款国产原研、自主可控并且能够实现单细胞多重蛋白定量分析的产品。打破了“卡脖子”技术，自研新型光敏凝胶材料，解决了单细胞免疫印迹技术低丰度蛋白检测难的挑战。 进口品牌由于垄断技术，导致设备溢价高、耗材贵、售后困难，目前仅支付能力较高的客户有能力购买，甚至出现因耗材试剂昂贵而导致设备采购后闲置的情况。MONO-X1完全自主技术，更低成本、更优品质，适合各类对科研装备品质和投入产出性价比追求的实验室和研发企业。

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该设备有应用案例吗？

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有的，我们可以提供几个应用场景做参考。 （建议直接邀约视频会议详细介绍） ① 肿瘤活检样本细胞异质性研究：我们知道信号通路的失调以及相同的细胞间变异是癌症的标志，核酸测量并不直接测量蛋白质介导的信号传导，而大多数癌症疗法靶向蛋白质和肿瘤异质性会驱动药物反应和耐药性。利用单细胞蛋白技术可以定量蛋白表达量，分析肿瘤活检组织肿瘤细胞异质性，为细胞异质性研究提供新的见解。 ② 细胞转染中单细胞融合蛋白共表达分析研究：快速准确地分析宿主细胞中的外源基因表达对于研究细胞和分子生物学中的基因功能至关重要，但仍然面临着报告基因和靶基因共表达不完全的挑战。单细胞多重蛋白分析系统mWB-X2用基于微芯片免疫印迹方法的单细胞转染效率分析芯片，能够快速准确地分析数千个宿主细胞个体中外源基因的表达差异，还可以用于稀有细胞 转染效率的分析和转染方法的评估。 ③ 炎症小体研究实验：利用单细胞Western技术，检测炎症小体相关蛋白的表达，定量单细胞蛋白表达量，鉴定及定量分析炎症小体相关亚群。 ④ 肿瘤循环细胞蛋白标志物研究：CTC是罕见的细胞，从肿瘤脱落到循环中，每7.5毫升血液发生1-500个细胞，大量的研究集中在通过利用这些癌细胞的独特特征（例如，表面蛋白表达，大小和可变形性）来分离CTC。然而，尽管CTC枚举和基因组学提供了见解，但两种测量都不能完全描述表型，在某些情况下，基因组学/转录组学与蛋白质表达之间的相关性较弱。利用单细胞蛋白技术能够在单个循环肿瘤细胞上检测多种蛋白质marker，液体活检提供更精准的诊断marker。

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该设备如何实现对低丰度蛋白质的灵敏检测？

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单细胞多重蛋白分析系统mWB-X2的凝胶微孔微阵列芯片是经过精密设计的，芯片上覆盖了一层光敏凝胶，凝胶层有序排列了6000个微孔，微孔可以捕获单个细胞，实现单细胞分辨率蛋白分析。细胞在微孔中原位裂解释放蛋白，再通过电泳将不同分子量的蛋白分离到微孔之间的凝胶泳道中，分离出的蛋白在紫外光的照射下会以共价键的形式固定到凝胶中，不用转膜等操作，可以直接在芯片上进行抗体孵育，这样就有效降低了蛋白损失，利于低丰度蛋白的检测，并且可以洗脱重孵育实现多路复用。 在适当的紫外光激发下，该新型光敏凝胶材料，30秒的蛋白固定效率可达80%，60秒就能够达到90%以上，是个非常快速的反应，且其背景荧光比较低，对于抗体孵育后低丰度蛋白的荧光检测干扰小，所以说这台设备在检测灵敏度和低丰度蛋白检测方面是独具优势的。

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单细胞多重蛋白分析系统mWB-X2与其他技术相比有什么优势？

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单细胞多重蛋白分析系统mWB-X2采用的是单细胞western blot技术：是一种测量单细胞蛋白表达的方法，通过电泳分离单细胞裂解物中的蛋白质，可使用常规western 抗体对细胞样品中蛋白质表达的异质性进行高度特异性的测量。单细胞 Western 可以分析分选（FACS 等技术）后的细胞样本，并简化具有挑战性的流式细胞仪分析。 传统Western blot检测方法实验步骤繁杂、实验周期较长，非常依靠人工操作，做不到微量细胞检测且实验结果平均掩盖数据差异性；RNA-seq技术是在基因水平直接对mRNA反转录出的cDNA片段进行高通量测序，但这并不等同于蛋白水平，决定了其对单细胞检测的局限性；流式细胞技术很多靶蛋白抗体来源受限，并且胞内蛋白检测操作难度大，需要固定和渗透。 相较而言： 1.单细胞western技术操作更简单、更快速； 2.可使用常规western抗体作为免疫探针，抗体选择面广； 3.通过溶解细胞样本释放蛋白，能更好地检测如转录因子等具有挑战性的蛋白质； 4.除了提供抗体结合信息外，还提供分子量信息，提高了测量的特异性； 5.可以多路复用，同时检测多种蛋白。

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设备可以检测几张芯片？

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MONO-X1目前配置的是MONO-X1一体机，单次实验可以检测单张芯片。后续会有多张芯片的机型，可同时进行1-8张芯片检测，实现高通量自动化。

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分析软件有哪些功能？可以导出数据吗？

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MONO-X1用的软件是针对蛋白分析专门定制的，能够在复杂样本中检测处理荧光蛋白各项数据，输出例如散点图、直方图等图表。软件可以自动识别泳道、自动识别蛋白杂交斑点，支持 TIF 格式文件输入，支持图像降噪、图像增强、图像分割，支持导出预处理的图像、编辑后的图像和数据图表。

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